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1、蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。该法试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量。

2、优点：灵敏度高，对水溶性蛋白质含量的测定很有效。缺点：①费时，要精确控制操作时间；②酚法试剂的配制比较繁琐。

3、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程：该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如tritonx-100、sds、np-40等。

4、巯基乙醇、DTT等。而对于去污剂和NaOH这两种干扰Bradford测定的物质，DC蛋白测定却可以兼容。如果蛋白是在loading buffer中，准备跑1D或2D电泳，或者刚从细胞裂解液中抽提出来，需要定量，那么RC DC蛋白测定更合适。

5、优点：快速，样品不会受到干扰。缺点：没有其他方法准确。双缩脲法(Biuret)工作原理：测量肽键，在540nm测定OD值。优点：快速，由于盐浓度的干扰比Bradford 法小，可用于追踪蛋白质分离过程。缺点：低浓度时测量不准确。

6、Bradford法蛋白定量：在一定的浓度范围内，蛋白质-染料复合物在波长为595nm处的光吸收与蛋白质含量成正比，通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。

bradford（bradford什么意思）

1、bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色，用分光光度计在吸光度595nm处读数，通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线，再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。

2、bradford法测定蛋白质含量，也就是考马斯亮蓝法，其原理是考马斯亮蓝在游离状态下呈棕红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为蓝色，蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。

3、注意事项：如果要求严格，最好在试剂加入后的5~20min内测定光吸收，因为这段时间内颜色是最稳定的。若选择在旋涡混合器上混合，注意不要太剧烈，以免产生大量气泡而难于消除。

4、但因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不同的，虽经校正，测定结果还存在着一定的误差。Bradford法1976年Bradford建立了用考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合的原理，是一种能够迅速并且准确的定量蛋白质的方法。

完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。该法试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构，缓冲液组分中有干扰试剂等。

Bradford法原理是将蛋白质及它的沉淀由蛋白质合酶结合至二价铬J络合物，从而形成一种光电的特异性比色反应。

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程：该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如tritonx-100、sds、np-40等。

优点：灵敏度高，对水溶性蛋白质含量的测定很有效。缺点：①费时，要精确控制操作时间；②酚法试剂的配制比较繁琐。

⑤色素结合法（Bradford 法）直接测定法：利用蛋白质与色素分子（Coomassie Brilliant Blue G-250）结合物的光吸收用分光光度法进行测定。考马斯亮兰（CBG）染色法测定蛋白质含量。

消化完毕后进行蒸馏，全部蒸馏完毕后用标准盐酸滴定各烧瓶中收集的氨量，直至指示剂混合液由绿色变回淡紫红色，即为滴定终点，结算出蛋白质含量。

1、Brad代表是Brad是Bradley，也就是布雷德利的昵称，Brad作为男孩的名字发音为brad，是古英语出身，布拉德的意思是“宽，宽”。也用作Bradford和Bradley的简写形式。男孩叫这个名字较多，出自威尔士语、英语。

2、brad 英[brd] 美[brd]n. 曲头钉；vt. 用无头钉固定；[网络] 土钉；销钉；平头钉；[例句]I saw you take money from him， brad.我看见你从他那里拿钱，布朗德。

3、布拉德皮特是尖脸，窄额头。布拉德·皮特（Brad Pitt），1963年12月18日出生于美国俄克拉何马州，美国电影演员、制片人。1987年，皮特以临时演员的身份参加了他的第一部电影《无主地》的拍摄。

4、Dota 英雄是指基于魔兽争霸3-冰封王座的多人实时对战自定义地图DotA(Defense of the Ancients)中，可供玩家选择并操作进行对战游戏的角色。每个英雄都有四个或以上的主、被动技能，有力量、敏捷、智力三种属性之分。

5、各个酒馆里的英雄详解，包括名字(含简称和外号)、属性、技能和明显的优缺点。